我们在使用 分光光度计测量吸光度时为什么读数会不断变化?
1、样品的稀释浓度
样品的稀释浓度同样是不可忽视的因素,由于样品中不可避免存在一些细小的颗粒,尤其是核酸样品。这些小颗粒的存在干扰测试效果。
2、核酸本身物化性质
溶解核酸的缓冲液的pH值、离子浓度等在测试时,离子浓度太高也会导致读数漂移,因此建议使用pH值一定、离子浓度较低的缓冲液(如TE)可大大稳定读数。核酸的吸光值受pH值和缓冲液离子浓度影响。只有在一定的pH值和低离子浓度的条件下(如10mMTris-HClpH8.0),才能得到精确的检测结果。水的pH值不稳定,可能导致检测误差。一些缓冲液在紫外范围内存在自身吸收,为了确保准确测量,请使用与悬浮或洗脱样品时相同的缓冲液。
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